孔雀石綠和結(jié)晶紫均為人工合成的有機(jī)化合物，屬于三苯甲烷類化學(xué)物，既是染料，也是殺真菌、殺細(xì)菌、殺寄生蟲的藥物。2019年12月27日，孔雀石綠被列入食品動(dòng)物中禁止使用的藥品及其他化合物清單[1]。毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，結(jié)晶紫是一種劑量相關(guān)的致癌物質(zhì)， 應(yīng)避免長(zhǎng)期、大劑量和大面積使用。本文建立了孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測(cè)定方法。
關(guān)鍵詞：
孔雀石綠，結(jié)晶紫，ShimNex CS C18，HPLC，熒光檢測(cè)器
實(shí)驗(yàn)部分Part One
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色譜儀（RF-20A熒光檢測(cè)器）；
色譜柱：ShimNex CS C18 5 μm 4.6×250 mm （貨號(hào)：380-01230-01）；
SHIMSEN Disc HPTFE針式過濾器（貨號(hào)：380-00341）；
LC/MS認(rèn)證樣品瓶LabTotal Vial（貨號(hào)：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液槍：SHIMSEN Pipet PMII-10（貨號(hào)：380-00751-02），SHIMSEN Pipet PMII-100（貨號(hào)：380-00751-04），SHIMSEN Pipet PMII-1000（貨號(hào)：380-00751-06）。
1.2 對(duì)照品溶液的制備
取隱色孔雀石綠和隱色結(jié)晶紫對(duì)照品適量加乙腈制成每1 mL含隱色孔雀石綠和隱色結(jié)晶紫各0.1 μg的溶液。
1.3 分析條件
色譜柱：ShimNex CS C18 5 μm 4.6×250 mm （貨號(hào)：380-01230-01）
柱溫：35℃
檢測(cè)器：激發(fā)波長(zhǎng)265 nm；發(fā)射波長(zhǎng)360 nm
流速：1.3 mL/min
進(jìn)樣量：20 μL
流動(dòng)相：A：0.05 M乙酸銨緩沖液（pH 4.5），B：乙腈，A：B = 20：80
本文建立了水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測(cè)定的HPLC-熒光檢測(cè)器方法。參照GB/T 20361-2006中的色譜條件，采用色譜柱ShimNex CS C18 對(duì)孔雀石綠、結(jié)晶紫的衍生產(chǎn)物隱色孔雀石綠、隱色結(jié)晶紫進(jìn)行分析。結(jié)果顯示各組分峰形和重現(xiàn)性良好，分離度大于 1.5 滿足檢測(cè)要求。此方法可為水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測(cè)定提供參考。
